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紫外分光光度計組成部件以及測定步驟
更新時間:2016-01-06   點擊次數(shù):5526次

紫外分光光度計作用和組成部件、手動紫外分光光度計與自動紫外分光光度計的區(qū)別、紫外分光光度計測定樣品步驟、紫外分光光度計連續(xù)測量一個樣品,沒拿出來出現(xiàn)吸收值下降原因以下將為您詳細(xì)說明,希望能對您有幫助。

       一、紫外分光光度計作用和組成部件

許多有機(jī)化合物在紫外區(qū)具有特征的吸收光譜,因此可用紫外分光光度法對有機(jī)物質(zhì)進(jìn)行定性鑒定,結(jié)構(gòu)分析及定量測定.紫外分光光度法定量測定的依據(jù)是比耳定律。首先確定化合物的紫外吸收光譜,確定較為大吸收波長。在選定的波長下,作出化合物溶液的工作曲線,根據(jù)在相同條件下測得待測液的吸光度值來確定待測液中化合物的含量。凡具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物,根據(jù)在特定吸收波長處所測得的吸收度,可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定。可見-紫外分光光度計。其應(yīng)用波長范圍為200~400nm的紫外光區(qū)、400~850nm的可見光區(qū)。紫外分光光度計主要由輻射源(光源)、色散系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、吸收池、數(shù)據(jù)處理機(jī)、自動記錄器及顯示器等部件組成。

二、手動紫外分光光度計與自動紫外分光光度計的區(qū)別

手動紫外分光光度計是帶刻度盤顯示波長的,只能用手動調(diào)節(jié)波長大小

自動紫外分光光度計是LCD或LED顯示波長的,通過設(shè)置鍵選擇需要的波長,再有馬達(dá)傳動走到設(shè)置的波長。
       紫外分光光度計

三、紫外分光光度計測定樣品步驟

1、首先,知道所需要測量物質(zhì)的特征吸收波長是多少這個可在國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)或其他相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)或方法。例如測量總氮的話,就需要220和275nm這2個波長,所以必須買紫外的光度計,并且?guī)щp波長測定功能,例如測總磷是697nm,只需買臺可見光度計就可以了。

2、2知道所測量的物質(zhì)的實驗方法,需要哪些儀器和設(shè)備,還有玻璃器皿等,同時還有比較完成測量所需要的所有化學(xué)試劑等。這個可以在標(biāo)準(zhǔn)或?qū)嶒灧椒ㄖ姓业剑驹诨ヂ?lián)網(wǎng)上都可以找到電子版的測量方法。

3、第三步配置好所需測量物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)濃度溶液,一般是5-8個標(biāo)準(zhǔn)溶液,濃度建議從高到低,建議每個不同濃度貼上標(biāo)簽,以防順序搞錯。注意,部分實驗需要往標(biāo)準(zhǔn)溶液中加顯色劑之后才可以用光度計進(jìn)行測量。

4、第四步設(shè)置好光度計的測量波長,這就需要熟悉光度計的基本操作,一般測量物質(zhì)的濃度都是用的標(biāo)準(zhǔn)曲線法,就是對應(yīng)光度計中的定量測量功能。具體操作時*步,把儀器的波長調(diào)整到我們所需要的波長,例如測量總磷直接把波長走到697nm,之后放入裝好蒸餾水的比色皿到樣品室做空白,就是熟稱的調(diào)零。第三部把標(biāo)準(zhǔn)溶液放入樣品室,依次測量他們的吸光度,儀器一般會自動記錄之后就會給出標(biāo)準(zhǔn)曲線方程,實驗完畢。如果儀器不能直接記錄吸光度,可以先記在筆記本上,之后用excel軟件進(jìn)行計算標(biāo)準(zhǔn)曲線。判斷做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線是否能用,看哪個R值即那個相關(guān)系數(shù),一般較為少做出0.999就可以用了,差一點的儀器也可以做出0.99.

5、第五步把未知樣品放入樣品室就可以直接測量出樣品濃度。

四、紫外分光光度計連續(xù)測量一個樣品,拿出來出現(xiàn)吸收值下降原因

這是由于開始外壁上的溶液沒有擦干凈,需檢查一下儀器是否穩(wěn)定,是否存在儀器造成的基線漂移如果是同一個比色皿沒有更換待測樣品溶液的話,便是儀器的問題,如果波動范圍為千分之幾的波動誤差,大可以忽略不計。另外,可在此波長下,用純水連續(xù)多次測定來觀測機(jī)器的穩(wěn)定性。有可能是儀器不太穩(wěn)定1儀器沒有事先預(yù)熱,不穩(wěn)定;2.光源已經(jīng)不行啦;3.聚集體隨著時間分解了,感覺不對路兩種可能:氘燈壽命出了問題;重新放入的樣如果不是一個容量瓶的話,建議做下溶液穩(wěn)定性試驗考慮是否是檢測器的問題,當(dāng)拿出樣品打開蓋光源遮住

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